Научно-практический медицинский рецензируемый журналISSN 1727-2378
Ru
En

Фагоцитоз и гуморальный иммунитет у детей, инфицированных вирусом герпеса человека 6-го типа

DOI:10.31550/1727-2378-2019-160-5-23-26
Библиографическая ссылка: Галич Е.Н., Соловьева И.Л., Кусельман А.И., Соловьева А.А., Закураева К.А., Ланков В.А. Фагоцитоз и гуморальный иммунитет у детей, инфицированных вирусом герпеса человека 6-го типа // Доктор.Ру. 2019. № 5 (160). С. 23–26. DOI: 10.31550/1727-2378-2019-160-5-23-26
Фагоцитоз и гуморальный иммунитет у детей, инфицированных вирусом герпеса человека 6-го типа
13 Мая 15:31

Цель исследования: определить особенности фагоцитоза и гуморального иммунитета у детей, инфицированных вирусом герпеса человека 6-го типа (HHV-6); изучить частоту встречаемости и клинические проявления инфекции у детей.

Дизайн: рандомизированное сравнительное групповое исследование.

Материалы и методы. Под наблюдением находился 91 ребенок: группы 1 и 2 (контрольные) — дети без признаков инфицирования герпес-вирусами в возрасте от 1 года до 7 лет и от 8 до 17 лет соответственно; группы 3 и 4 (основные) — дети с признаками инфицирования HHV-6, но без острых проявлений инфекции в возрасте от 1 года до 7 лет и от 8 до 17 лет соответственно.
Применяли методы верификации возбудителя, иммуноферментный анализ для определения уровней иммуноглобулинов A, G, M, проточную цитофлуориметрию для оценки фагоцитарной системы.

Результаты. В группах 3 и 4 выявлены экзантема (52,9% и 25,0%), интоксикационный (35,3% и 16,7%) и лимфопролиферативный (47,1% и 33,3%) синдромы. Первичное инфицирование HHV-6 чаще отмечалось в группе 3. В основных группах уровни иммуноглобулинов не отличались от контрольных, фагоцитарное число и фагоцитарный индекс были статистически значимо (p < 0,05) снижены.

Заключение. Первичное инфицирование HHV-6 чаще происходит в возрасте от 1 года до 7 лет, оно не влияет на уровни иммуноглобулинов А, G, M, но приводит к снижению фагоцитоза. Клинические особенности инфекции зависят от возраста.

Авторы заявляют об отсутствии возможных конфликтов интересов.

Галич Екатерина Николаевна — аспирант кафедры педиатрии ФГБОУ ВО УлГУ. 432002, г. Ульяновск, ул. Л. Толстого, д. 42. eLIBRARY.RU SPIN: 1764-6188. E-mail: kate-reznikova@mail.ru

Соловьева Анна Анатольевна — студентка 6-го курса педиатрического отделения ФГБОУ ВО УлГУ. 432002, г. Ульяновск, ул. Л. Толстого, д. 42. E-mail: kate-reznikova@mail.ru

Кусельман Алексей Исаевич — профессор кафедры педиатрии ФГБОУ ВО УлГУ, д. м. н., профессор. 432002, г. Ульяновск, ул. Л. Толстого, д. 42. E-mail: kate-reznikova@mail.ru

Соловьева Ирина Леонидовна — д. м. н., профессор, заведующая кафедрой педиатрии ФГБОУ ВО УлГУ. 432002, г. Ульяновск, ул. Л. Толстого, д. 42. eLIBRARY.RU SPIN: 7163-2382. E-mail: kate-reznikova@mail.ru

Закураева Карина Анзоровна — студентка 6-го курса педиатрического отделения ФГБОУ ВО УлГУ. 432002, г. Ульяновск, ул. Л. Толстого, д. 42. eLIBRARY.RU SPIN: 5215-7869. E-mail: kate-reznikova@mail.ru

Ланков Владислав Анатольевич — студент 6-го курса педиатрического отделения ФГБОУ ВО УлГУ. 432002, г. Ульяновск, ул. Л. Толстого, д. 42. E-mail: kate-reznikova@mail.ru

Вирус герпеса человека 6-го типа (HHV-6) играет существенную роль в возникновении рецидивирующих заболеваний и может вызывать изменения в иммунном статусе. В настоящее время значимость герпетических инфекций возрастает. В связи с инфицированием в первые годы жизни увеличилось количество заболеваний ЦНС, лор-органов; одно из частых клинических проявлений инфицированности HHV-6 — фебрильные судороги у детей. Вирусы семейства Herpesviridae имеют способность к латенции и персистенции, и их репродукция происходит в клетках как иммунной, так и нервной системы [1, 2].

Клинические проявления герпетической инфекции зависят от реактивности организма, а именно от его иммунного статуса [3, 4]. Геном вируса способен к интеграции в геном клетки-хозяина, что обусловливает патогенетические сдвиги в метаболизме последней. Вирусы семейства Herpesviridae также имеют тропность к форменным элементам крови [5–7].

Патологическое действие вируса ярко представлено в изменениях клеток: в разрыхлении пласта эпителия; изменении формы ядра (ядро становится похожим на боб, песочные часы) и перемещении его к одному полюсу; утолщении кариолеммы (очаговые редупликации); маргинации хроматина и скоплении его в глыбки; полном лизисе ядерных веществ; во внутриядерных включениях; в вакуолизации цитоплазмы, которая даже может исчезнуть (остаются «голые» ядра). Внутриядерные включения могут состоять из гранулярного материала с пучками фибриллярных структур, вирусных частиц, мембранных осколков [8]. Морфологические изменения клеток, а следовательно, микро- и макроизменения органов, вызванные вирусом простого герпеса (ВПГ), имеют свои характерные проявления и могут частично сохраняться в течение нескольких месяцев после выздоровления [9–11]. В ряде исследований показано, что при герпетической инфекции сокращается общее количество CD3+-клеток (общие Т-лимфоциты), Т-клеток фенотипа CD3+CD4+ (Т-хелперы), уменьшается иммунорегуляторный индекс (CD4/CD8), снижаются активность естественных киллеров и антителозависимая клеточная цитотоксичность, а также угнетается способность лейкоцитов к синтезу эндогенного интерферона [5–7]. В одном из исследований выявлено снижение фагоцитарной функции нейтрофилов, как поглотительной, так и переваривающей [8]. Перечисленные изменения характерны для взрослых больных со среднетяжелым и тяжелым течением заболевания.

Сведения о распространенности HHV-6-инфекции, в том числе в детской популяции, разнятся, данные по отдельным регионам России малочисленны. Особенности системы фагоцитоза и гуморального ответа у детей разного возраста вне острого периода заболевания изучены недостаточно. Эти обстоятельства послужили поводом для представляемой работы.

Цель исследования: определить особенности фагоцитоза и гуморального иммунитета у детей, инфицированных вирусом герпеса человека 6-го типа, а также изучить частоту встречаемости и клинические проявления этой инфекции у детей.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Исследование проводилось на клинической базе кафедры педиатрии Ульяновского государственного университета — в Ульяновской ОДКБ им. политического и общественного деятеля Ю.Ф. Горячева под руководством профессора кафедры педиатрии д. м. н. И.Л. Соловьевой.

Под наблюдением находился 91 ребенок в возрасте от 1 года до 17 лет. Для сравнительного исследования фагоцитоза и гуморального иммунитета были сформированы четыре группы:
  • первая группа (контрольная) — дети в возрасте от 1 года до 7 лет без признаков инфицирования герпетическими вирусами (n = 30);
  • вторая группа (контрольная) — дети в возрасте от 8 до 17 лет без признаков инфицирования герпетическими вирусами (n = 15);
  • третья группа (основная) — дети в возрасте от 1 года до 7 лет с признаками инфицирования HHV-6 (n = 34);
  • четвертая группа (основная) — дети в возрасте от 8 до 17 лет с признаками инфицирования HHV-6 (n = 12).
Критерием включения в основные группы являлось наличие признаков инфицирования HHV-6, критериями исключения были острые проявления инфекции и наличие сочетанного инфицирования герпетическими вирусами.

Протокол исследования одобрен локальным этическим комитетом (решение № 12 от 07.12.2016). Участники исследования или их законные представители подписывали информированное согласие на обследование.

Первичную инфицированность HHV-6 определяли в ходе общего клинического осмотра, с помощью специально разработанного опросника, а также методом ПЦР в режиме реального времени и по уровням иммуноглобулинов М и G в сыворотке крови, установленным методом ИФА.

Специфические IgM и IgG к герпес-вирусам выявляли методом ИФА с применением тест-систем «ВектоВПГ-1,2-IgM-стрип», «ВектоВПГ-1,2-IgG-стрип», «Векто-HHV-6,7,8-IgG-стрип», «Векто-ЦМВ-IgM-стрип», «Векто-ЦМВ-IgG-стрип», «ВектоВЭБ-NA-IgG-стрип», «ВектоВЭБ-EA-IgG-стрип», «ВектоВЭБ-VCA-IgМ-стрип» (Вектор-Бест, Россия).

Для обнаружения ДНК вирусов герпес-группы использовали метод ПЦР в режиме реального времени, для определения уровней сывороточных иммуноглобулинов A, G, M — метод ИФА. Показатели фагоцитоза (фагоцитарный индекс, фагоцитарное число) в основных и контрольных группах устанавливали посредством проточной цитофлуориметрии.

Данные исследования проводились на базе Ульяновской ОДКБ им. политического и общественного деятеля Ю.Ф. Горячева заведующей иммунологической лабораторией А.А. Гущиной.
Для обработки собранных данных статистические показатели были сгруппированы по однородным качественным и количественным учетным признакам. Полученные результаты подвергались компьютерной обработке с использованием программ Statistica Base 10, Microsoft Office Excel. Свойства статистической совокупности представлены с использованием закона нормального распределения (распределение Гаусса), поскольку он позволяет обосновать выбор конкретных методов статистического анализа. Проверку нормальности распределения данных выполняли визуально по графикам Histograms и Normal probability plots, а также с применением критерия Колмогорова — Смирнова с поправкой Лиллиефорса и критерия Шапиро — Уилка. Проверку гипотез о равенстве двух средних производили с использованием U-критерия Вилкоксона — Манна — Уитни. Различия считали статистически значимыми при p < 0,05.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
Изучение клинических проявлений инфицирования HHV-6 в основных группах показало, что в каждой из них преобладают определенные симптомы.

У 16 (47,1%) и 4 (33,3%) детей младшего и старшего возраста соответственно, инфицированных HHV-6, имел место лимфопролиферативный синдром, который характеризовался увеличением лимфатических узлов, иногда печени и селезенки. При этом увеличение регионарных лимфатических узлов статистически значимо чаще регистрировалось в третьей группе, а увеличение печени — в четвертой группе (в обоих случаях p < 0,05); рост селезенки обнаружен только у пациентов в возрасте 8–17 лет (рис. 1).

Рис. 1. Лимфопролиферативный синдром у детей, инфицированных вирусом герпеса человека 6-го типа, %.
Примечание. По всем показателям различия между группами статистически значимы: p < 0,05 (U-критерий Вилкоксона — Манна — Уитни)
r5_1.jpg 

Заложенность носа — один из компонентов патогенеза и следствие лимфотропности патогенного вируса. Соответствующие жалобы в третьей группе предъявляли 5 (14,7%) детей, в четвертой группе — 3 ребенка (25,0%). Бóльшая частота аденоидных вегетаций также наблюдалась у детей четвертой группы: 25,0% (n = 3) против 20,6% (n = 7) в третьей группе. Возможно, это связано с увеличением количества случаев инфекционных заболеваний у детей старшего возраста.

Интоксикационный синдром, включавший в себя повышенную утомляемость, субфебрильную температуру без видимого очага инфекции и снижение аппетита, в младшей группе отмечался в 2 раза чаще, чем в старшей: у 35,3% (n = 12) и 16,7% (n = 2) детей соответственно. При рассмотрении этого синдрома общая закономерность не выделена: в третьей группе превалировали жалобы на снижение аппетита, у каждого 8-го ребенка происходило повышение температуры до субфебрильных цифр без видимого очага инфекции, у каждого 11-го наблюдалась повышенная утомляемость, а в четвертой группе предъявлялись жалобы только на повышенную утомляемость, но их частота была выше, чем у младших детей (рис. 2).

Рис. 2. Интоксикационный синдром у детей, инфицированных вирусом герпеса человека 6-го типа, %.
Примечание. По всем показателям различия между группами статистически значимы: p < 0,05 (U-критерий Вилкоксона — Манна — Уитни)
r5_2.jpg 

Синдром экзантемы выявлен у 52,9% (n = 18) детей третьей группы: макулопапулезная сыпь регистрировалась у 18, мелкопятнистая — у 10 (29,4%), пятнистопапулезная или другая — у 8 (23,5%) исследуемых, зуд кожи наблюдался в 12 случаях (35,3%). В четвертой группе отмечена лишь пятнистопапулезная сыпь (n = 3; 25,0%).
Первичная инфицированность HHV-6 в третьей группе составила 41,2% (n = 14), в четвертой группе — 25,0% (n = 3). Таким образом, инфекция чаще манифестировала в младшей группе, что, вероятнее всего, связано с началом социализации: дети начинают посещать детский сад, школы раннего развития, спортивные секции, подготовительные занятия.
При определении уровней иммуноглобулинов А, G, M в объединенной основной и объединенной контрольной группах статистически значимых различий исследуемых показателей у инфицированных пациентов вне заболевания и у детей без признаков инфицирования не выявлено (табл. 1).

Таблица 1
Уровни иммуноглобулинов А, G, M у испытуемых без признаков инфицирования герпетическими вирусами и детей, инфицированных вирусом герпеса человека 6-го типа, вне заболевания, Ед/мл (M ± m)
5_1.jpg 

При оценке значений фагоцитарного индекса и фагоцитарного числа обнаружено статистически значимое снижение обоих показателей в объединенной основной группе по сравнению с объединенной контрольной группой (табл. 2).

Таблица 2
Система фагоцитоза у испытуемых без признаков инфицирования герпетическими вирусами и детей, инфицированных вирусом герпеса человека 6-го типа, вне заболевания (M ± m)
5_2.jpg 
* Различия с группой неинфицированных детей статистически значимы: p < 0,05 (U-критерий Вилкоксона — Манна — Уитни).

Одним из механизмов формирования вирусной персистенции могут быть изменения в фагоцитарном звене: снижение количества активных фагоцитов у инфицированных HHV-6 в сравнении с таковым у неинфицированных. Это может свидетельствовать об ингибирующем воздействии персистирующих инфекций, что подтверждается также угнетением переваривающей функции фагоцитов по полученным результатам (показатель завершенности фагоцитоза в объединенной основной группе практически на 22% ниже, чем в контрольной).

Результаты проведенного исследования позволяют сделать вывод о том, что первичное инфицирование HHV-6 наиболее часто происходит в возрасте от 1 года до 7 лет. Это согласуется с данными литературы [12, 13] и, вероятно, связано с тем, что именно в указанном возрастном интервале начинается социализация детей, которая способствует расширению контактов и росту риска инфицирования различными возбудителями.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ
В проведенном исследовании выявлены особенности клинической картины, а также преобладание определенных симптомов в зависимости от возраста. Так, у детей от 1 года до 7 лет ведущее место занимали синдром экзантемы, лимфаденопатия и интоксикационный синдром, а в возрасте от 8 до 17 лет чаще всего встречались лимфаденопатия, гепатолиенальный синдром и аденоидные вегетации. Специфику клинической картины у детей разного возраста можно объяснить различиями в реактивности организма, его иммунном статусе, а также способностью герпес-вирусов к длительной латенции и персистенции [1], в связи с чем предположительно могут изменяться некоторые иммунологические параметры.

Однако при оценке гуморального звена иммунитета, а именно уровней иммуноглобулинов А, G, M, у инфицированных детей не выявлено статистически значимых отличий от контрольных показателей. Полученные результаты позволяют предположить, что у детей, инфицированных вирусом герпеса человека 6-го типа (HHV-6), не имеющих острых проявлений герпетической инфекции, устанавливается определенное равновесие между синтезом и распадом иммуноглобулинов А, G, M.

С другой стороны, фагоцитарный индекс и фагоцитарное число у детей, инфицированных HHV-6, оказались статистически значимо ниже, чем в объединенной контрольной группе. Аналогичные изменения фагоцитарного звена выявлены в остром периоде герпетической инфекции у взрослых пациентов [8]. Это позволяет предположить, что у детей, инфицированных HHV-6, даже вне острого периода заболевания возможны патофизиологические изменения.

Фагоцитоз и гуморальный иммунитет у детей, инфицированных вирусом герпеса человека 6-го типа
13 Мая 15:31
ЛИТЕРАТУРА
  1. Кусельман А.И., Соловьева И.Л., Черданцев А.П.; Кусельман А.И., ред. Герпесвирусные инфекции у детей: Руководство для врачей. Ульяновск: изд-во УлГУ; 2017. 280 с. [Kusel'man A.I., Solov'eva I.L., Cherdantsev A.P.; Kusel'man A.I., red. Gerpesvirusnye infektsii u detei: Rukovodstvo dlya vrachei. Ul'yanovsk: izd-vo UlGU; 2017. 280 s. (in Russian)]
  2. Соловьева И.Л. Особенности вакцинального процесса и способы повышения эффективности вакцинации против гепатита В, кори, эпидемического паротита у детей с измененным преморбидным фоном: Дис. … докт. мед. наук. Ульяновск — М., 2006: 72–86. [Solov'eva I.L. Osobennosti vaktsinal'nogo protsessa i sposoby povysheniya effektivnosti vaktsinatsii protiv gepatita V, kori, epidemicheskogo parotita u detei s izmenennym premorbidnym fonom: Dis. … dokt. med. nauk. Ul'yanovsk — M., 2006: 72–86. (in Russian)]
  3. Каражас Н.В., Малышев Н.А., Рыбалкина Т.Н., Калугина М.Ю., Бошьян Р.Е., Кистенева Л.Б. и др. Современные аспекты герпесвирусной инфекции. Эпидемиология, клиника, диагностика, лечение и профилактика: Методические рекомендации. М.; 2013: 15–8. [Karazhas N.V., Malyshev N.A., Rybalkina T.N., Kalugina M.Yu., Bosh'yan R.E., Kisteneva L.B. i dr. Sovremennye aspekty gerpesvirusnoi infektsii. Epidemiologiya, klinika, diagnostika, lechenie i profilaktika: Metodicheskie rekomendatsii. M.; 2013: 15–8. (in Russian)]
  4. Галич Е.Н., Соловьева И.Л., Соловьева А.А., Закураева К.А., Ланков В.А., Васильева А.М. Особенности системы фагоцитоза и гуморального ответа у детей, инфицированных вирусом герпеса человека 6-го типа. Журн. инфектологии. 2017; 9(2): 37. [Galich E.N., Solov'eva I.L., Solov'eva A.A., Zakuraeva K.A., Lankov V.A., Vasil'eva A.M. Osobennosti sistemy fagotsitoza i gumoral'nogo otveta u detei, infitsirovannykh virusom gerpesa cheloveka 6-go tipa. Zhurn. infektologii. 2017; 9(2): 37. (in Russian)]
  5. Никитская Е.А., Гривель Ж.-Ш., Марюхнич Е.В., Лебедева А.М., Иванова О.И., Саввинова П.П. и др. Цитомегаловирус в плазме больных острым коронарным синдромом. Acta Naturae. 2016; 8(2): 114–9. [Nikitskaya E.A., Grivel' Zh.-Sh., Maryukhnich E.V., Lebedeva A.M., Ivanova O.I., Savvinova P.P. i dr. Tsitomegalovirus v plazme bol'nykh ostrym koronarnym sindromom. Acta Naturae. 2016; 8 (2): 114–9. (in Russian)]
  6. Мелёхина Е.В., Чугунова О.Л., Музыка А.Д., Калугина М.Ю., Акопян А.С., Любезнова И.Г. и др. Роль герпесвирусных инфекций в формировании патологии у детей: Методические рекомендации. М.; 2014. 50 с. [Melekhina E.V., Chugunova O.L., Muzyka A.D., Kalugina M.Yu., Akopyan A.S., Lyubeznova I.G. i dr. Rol' gerpesvirusnykh infektsii v formirovanii patologii u detei: Metodicheskie rekomendatsii. M.; 2014. 50 s. (in Russian)]
  7. Мелёхина Е.В., Чугунова О.Л., Николич А.Д., Шумилов П.В., Акопян А.С., Калугина М.Ю. Течение инфекции, ассоциированной с вирусом герпеса человека 6-го типа, у детей. Дет. больница. 2013; 4: 3–8. [Melekhina E.V., Chugunova O.L., Nikolich A.D., Shumilov P.V., Akopyan A.S., Kalugina M.Yu. Techenie infektsii, assotsiirovannoi s virusom gerpesa cheloveka 6-go tipa, u detei. Det. bol'nitsa. 2013; 4: 3–8. (in Russian)]
  8. Хитрик Н.М. Функциональная активность фагоцитов у больных с инфекцией, вызванной вирусом простого герпеса: Автореф. дис. … канд. мед. наук. М., 2007. 28 с. [Khitrik N.M. Funktsional'naya aktivnost' fagotsitov u bol'nykh s infektsiei, vyzvannoi virusom prostogo gerpesa: Avtoref. dis. … kand. med. nauk. M., 2007. 28 s. (in Russian)]
  9. Исаков В.А., Архипова Е.И., Исаков Д.В.; Исаков В.А., ред. Герпесвирусные инфекции человека: Руководство для врачей. СПб.: СпецЛит; 2013. 670 с. [Isakov V.A., Arkhipova E.I., Isakov D.V.; Isakov V.A., red. Gerpesvirusnye infektsii cheloveka: Rukovodstvo dlya vrachei. SPb.: SpetsLit; 2013. 670 s. (in Russian)]
  10. Вашура Л.В., Савенкова М.С. Герпес 6-го типа (эпидемиология, диагностика, клиника). Эффектив. фармокотерапия. 2017; 23: 6–9. [Vashura L.V., Savenkova M.S. Gerpes 6-go tipa (epidemiologiya, diagnostika, klinika). Effektiv. farmokoterapiya. 2017; 23: 6–9. (in Russian)]
  11. Симонова Е.В., Харламова Ф.С., Учайкин В.Ф., Дроздова И.М., Егорова Н.Ю. Поражение ЦНС при герпесвирусной моно- и микст-инфекции 6-го типа у детей. Педиатрия. Журн. им. Г.Н. Сперанского. 2016; 95(2): 22–9. [Simonova E.V., Kharlamova F.S., Uchaikin V.F., Drozdova I.M., Egorova N.Yu. Porazhenie TsNS pri gerpesvirusnoi mono- i mikst-infektsii 6-go tipa u detei. Pediatriya. Zhurn. im. G.N. Speranskogo. 2016; 95(2): 22–9. (in Russian)]
  12. Мелёхина Е.В., Музыка А.Д., Калугина М.Ю., Горелов А.В., Чугунова О.Л. Современные представления об инфекции, вызванной вирусом герпеса человека 6 типа. Архивъ внутренней медицины. 2016; 1(27): 13–9. [Melekhina E.V., Muzyka A.D., Kalugina M.Yu., Gorelov A.V., Chugunova O.L. Sovremennye predstavleniya ob infektsii, vyzvannoi virusom gerpesa cheloveka 6 tipa. Arkhiv vnutrennei meditsiny. 2016; 1(27): 13–9. (in Russian)]
  13. Caserta M.T., Hall C.B., Schnabel K., Long C.E., D'Heron N. Primary human herpesvirus 7 infection: a comparison of human herpesvirus 7 and human herpesvirus 6 infections in children. J. Pediatr. 1998; 133(3): 386–9.

Партнеры